1.细菌形态:具有细胞壁和核质的单细胞原核细胞型微生物。无成形的细胞核,无完整的细胞器。以微米(μm)为测量单位。在固体培养基上培养,肉眼可见菌体集落。细菌形态:分球菌(双球菌、链球菌、葡萄球菌)、杆菌(棒状杆菌、球杆菌、分支杆菌)、螺形菌(弧菌、螺菌)。群体形态:菌落(肉眼可见、一定形态独立群体)、菌苔(菌落连成一片)。
2.细菌结构(1)细胞壁:革兰氏阳性菌(G +):①肽聚糖(黏肽):为聚糖骨架;原核生物细胞特有。②磷壁酸:G +菌特有;其抗原性较强:黏附宿主细胞。革兰氏阴性菌(G -):①肽聚糖:少量的。②外膜:外膜蛋白:脂蛋白、微孔蛋白。脂质双层:内镶嵌着多种外膜蛋白。脂多糖:类脂A(内毒素成分)。核心多糖:具有属特异性。特异性多糖:具有种型特异性。③周浆间隙:外膜与细胞膜之间,可获得营养,解除病毒。(2)细胞壁功能:①维持菌体固有形态,保护细菌抵抗低渗环境。②与细胞内、外物质交换有关。③细胞壁表面结构带有多种决定细菌抗原性的抗原决定簇。④与细菌致病性有关,阴性菌脂多糖具有内毒素作用,阳性菌磷壁酸对宿主黏附。(3)细胞膜①定义:为脂质双层,并镶嵌有特殊功能的载体蛋白酶类;不含胆固醇。②功能:物质交换、分泌胞外酶、产生与利用能量有关、细胞生物合成的场所。(4)细胞质①成分:水、蛋白质、脂类、核酸、少量无机盐、核糖体、质粒(为超微结构)②核糖体:由RNA和蛋白质组成;是蛋白质合成场所。③质粒:定义:细胞染色体外的遗传物质,为闭合环状双股DNA分子。基因工程转运载体。包括:F质粒:决定细菌的致育性。R质粒:决定耐药性。毒力质粒:决定致病性。(5)核体:染色体(裸露的双链DNA)
3.阳性菌:革兰氏染色为紫色;阴性菌:革兰氏染色为红色。
4.细胞壁的功能:维持固有形态、物质交换、携带有抗原决定簇与致病性有关。
5.细菌特殊结构:(1)荚膜:①为黏液样物质;②为多糖或多肽或透明质酸;③在营养丰富时才形成;④能抵抗吞噬;⑤有特异性抗氧。(2)鞭毛:①细长波浪状物;②成分为蛋白质;③能运动(沙门氏菌);④有特异的H抗原;⑤与黏附有关。(3)菌毛:①普通菌毛:有黏附功能的;②性菌毛:F基因菌毛。化学成分为蛋白质;与细菌的运动无关,有良好的抗原性。(4)芽孢:①定义:一定条件下胞质脱水浓缩形成;有多层膜包裹;通透性低;有完整核质和酶系统;代谢静止;不能分裂繁殖。是抵抗不良环境的特殊形成。②灭活方法:160°C干热灭菌或高压蒸汽灭菌杀死。
6.细菌染色方法:(1)革兰氏染色法的程序:草酸铵结晶紫染色1min→碘液染1min→95%醇脱色30s→碳酸复红染1min。意义:鉴别细菌、选择抗菌药物。(2)瑞氏染色法:将细菌染成蓝色;组织细胞的细胞核染成蓝色;背景和细胞浆染成红色。(3)抗酸染色法:常用于结核杆菌、副结核杆菌的染色(红色)。顺序是:碳酸复红微热3 ~ 5min→3%盐酸酒精脱色→碱性美兰复红染1min。(4)特殊染色法:包括抗酸染色法、芽孢、荚膜、鞭毛染色法。
7.细菌的生长条件:(1)营养物质:水分、碳源、氮源、无机盐、生长因子。(2)酸碱度:最适宜pH值为7. 2 ~ 7. 6,霍乱弧菌pH值8. 4 ~ 9. 2,结核分支杆菌pH值6 ~ 6. 5。(3)温度:大多数最适合温度37°C,嗜冷菌(- 5 ~ 30°C)最适合是10 ~ 20°C,嗜温菌(10 ~45°C)最适合20 ~ 40°C,嗜热菌(25 ~ 95°C)最适合50 ~ 60°C。(4)气体:专性需氧菌(结核杆菌)、微需氧菌(空肠弯曲菌)、专性厌氧菌(破伤风芽孢杆菌)、兼性厌氧菌(大多数菌,葡萄球菌、伤寒沙门氏菌)。(5)渗透性:少数嗜盐菌需要在较高质量分数(3%)氯化钠环境中才能生长良好。
8.世代时间:一个菌体以二分裂方式繁殖为两个菌体所需的时间。一般细菌20 ~ 30min,结核分支杆菌18 ~ 20h。菌落形成单位(CFU):将样本稀释后在固体培养基上培养,根据形成的菌落数进行细菌计数。
9.细菌的生长曲线分为四个时期:(1)迟缓期:菌体增大,代谢活跃;分裂迟缓,细菌数增加不显著。初培养1 ~ 4h。(2)对数期:活菌数对数直线上升;生物活性典型;对抗生素敏感。(3)稳定期:新繁殖的活菌数与死菌数平衡;产生芽孢、外毒素等。(4)衰亡期:死菌数超过活菌数;菌体形态改变。
10.细菌新陈代谢的能量由ATP供给。
11.细菌生物氧化的类型(1)发酵:以有机物为受氢体。(2)有氧呼吸:以氧气为受氢体。(3)厌氧呼吸:以无机物硝酸盐为受氢体。
12.细菌合成的代谢产物:(1)热原质(致热源):阴性菌细胞壁脂多糖,阳性菌的多糖。严格无菌操作。(2)毒素:内毒素为阴性菌死后释放脂多糖,外毒素为阳性菌分泌的蛋白质。(3)侵袭性酶类:透明质酸酶(促使细菌扩散)、卵磷脂酶、链激酶等。(4)色素:对细菌鉴别有意义,分脂溶性和水溶性两种。铜绿假单胞菌产绿色色素、金黄色葡萄球菌合成脂溶性金黄色色素。(5)细菌素:仅对近缘菌株有抗菌作用的蛋白质或蛋白质与脂多糖的复合物,如:绿脓菌素。(6)抗生素:能杀灭或抑制其他微生物或肿瘤细胞的物质。多由放线杆菌和真菌产生。(7)维生素:某些细菌能合成自身所需的维生素,如大肠杆菌能合成维生素B、维生素K。
13.细菌的分解代谢与生化试验:(1)氧化发酵试验:大肠杆菌产酸产气;沙门菌产酸不产气。(2)氧化酶试验:阳性者为紫色。(阳性菌有假单胞菌、气单胞菌;阴性菌有:肠科杆菌)(3)过氧化氢酶试验:阳性者产生气泡。(阳性:葡萄球菌、微球菌。阴性:链球菌)(4)硫化氢试验:产生黑色为阳性(阳性:变形杆菌;阴性:大肠杆菌)(5)尿素酶试验:阳性者呈红紫色(阳性:变形杆菌;阴性:沙门氏菌)(6)吲哚试验:阳性呈红色(阳性:大肠杆菌、变形杆菌)(7)甲基红试验(MR):红色反应为阳性(阳性:大肠杆菌;阴性:产气杆菌)(8)VP试验:阳性呈红色(阳性:产气杆菌;阴性:大肠杆菌)(9)枸橼酸盐利用试验(C):培养基变深蓝为阳性(阳性:产气杆菌;阴性:大肠杆菌)(10)IMVC试验:大肠杆菌+ + - -;产气杆菌- - + +
14.固体培养基中琼脂含量1. 5%~ 2%;半固体培养基中琼脂含量0. 5%。
15.基础培养基:常用普通肉汤培养基,含蛋白胨、牛肉浸膏、NaCl、水等;常用于糖发酵试验。
16.营养培养基:在基础培养基中加入葡萄糖、血液、血清、酵母浸膏等;常用血琼脂平板。
17.选择培养基:麦康凯培养基含有胆酸盐抑制阳性菌生长,利于大肠杆菌、沙门氏菌生长。
18.鉴别培养基:培养基加入特定物质作底物及指示剂,用肉眼鉴别细菌。如各种糖发酵管、硫化氢管、伊红美蓝培养基。
19.厌氧培养基:常用疱肉培养基;即在肉浸液中加入煮过的肉渣,用凡士林或石蜡封口。
20.液体培养基生长现象:①浑浊生长(葡萄球菌);②沉淀生长(链球菌);③菌膜生长(枯草杆菌)。
21.半固体培养基中的生长现象:沿穿刺线生长或穿刺线向四周扩散呈放射状生长。
22.固体培养基中的生长现象:平板上划线后形成菌落;斜面上划线重叠形成菌苔。
23.人工培养细菌意义:细菌的鉴定、传染疾病的诊断、分子流行病学调查、生物制品的制备、饲料或畜产品卫生学指标的检测。